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两个大豆肌醇半乳糖苷合成酶基因的原核诱导表达

文献类型： 中文期刊

作者： 张军 1 ; 史同瑞 1 ; 邱爽 2 ; 何佳琦 2 ; 李铭杨 2 ; 翟莹 2 ;

作者机构： 1.黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院

2.齐齐哈尔大学生命科学与农林学院

关键词： 大豆;肌醇半乳糖苷合成酶;原核表达;载体构建

期刊名称： 黑龙江农业科学

ISSN： 1002-2767

年卷期： 2020 年 008 期

页码： 13-17

摘要： 肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)是棉子糖系列寡糖(RFOs)生物合成途径中的关键酶,在植物应对非生物胁迫过程中发挥重要作用.本研究通过RT-PCR从大豆叶片cDNA中扩增获得编码GolS的GmGolS2-1和GmGolS2-3基因.添加酶切位点EcoRⅠ和SalⅠ,将GmGolS2-1和GmGolS2-3分别连入原核表达载体pET28中,转化大肠杆菌Rosetta(DE3),进行IPTG诱导表达.SDS-PAGE电泳分析诱导浓度和诱导时间对蛋白表达的影响.结果表明:在诱导时间为3 h,IPTG浓度为0.1 mmol·L-1时,可获得大量GmGolS2-1和GmGolS2-3的重组蛋白,分子量均大约为40 kD.

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