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细胞穿透肽介导的小黑麦小孢子遗传转化研究

文献类型: 中文期刊

作者: 刘大普 1 ; 杨凤萍 2 ; 张晓东 3 ;

作者机构: 1.北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心;北京农学院植物科学技术学院

2.;北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心;北京农学院植物科学技术学院

3.;北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心;北京农学院植物科学技术学院;

关键词: 小黑麦;小孢子;细胞穿透肽;转化

期刊名称: 中国农学通报

ISSN: 1000-6850

年卷期: 2017 年 20 期

页码: 29-34

摘要: 本研究选用小黑麦小孢子作为供试材料,进行细胞穿透肽介导的植物单倍体细胞遗传转化可行性研究。提取单核靠边期的小黑麦小孢子进行悬浮培养,将细胞穿透肽与报告基因GFP的表达框复合物对小孢子进行转化。转化植株进行了PCR分子检测,并在荧光体视显微镜下观察外源GFP基因的表达情况。共获得21株候选转基因植株,其中染色体自然加倍植株为10株。T1代加倍植株的PCR检测结果显示,加倍的转基因株系中有3个株系的PCR检测结果呈阳性。通过荧光体视显微镜可在转基因植株的幼胚部位观测到GFP蛋白的荧光。以上结果表明外源GFP基因已经整合到小黑麦基因组上并且得到表达并稳定遗传。因此,由细胞穿透肽介导的植物单细胞转化是一种有效、可行的植物单细胞转基因方法。

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