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短沟对虾和斑节对虾酚氧化酶原基因的克隆和序列分析

文献类型: 中文期刊

作者: 叶星 1 ; 郑清梅 1 ; 白俊杰 1 ; 劳海华 1 ; 简清 1 ; 罗建仁 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所

关键词: 短沟对虾;斑节对虾;酚氧化酶原;碱基;氨基酸;同源性

期刊名称: 海洋与湖沼

ISSN: 0029-814X

年卷期: 2003 年 34 卷 05 期

页码: 74-81

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用RT PCR原理和长片段扩增技术克隆短沟对虾和斑节对虾酚氧化酶原基因。设计合成特异引物、提取血细胞总RNA ,反转录后扩增获得的特异片段回收并克隆到pGEM TEasyVector系统的T载体上 ,重组子进行碱基序列测定。结果表明 ,所克隆的短沟对虾酚氧化酶原基因含起始密码子ATG到终止密码子TGA的 2 0 5 5bp ,编码 6 84个氨基酸。斑节对虾酚氧化酶原基因含ATG到TGA的 2 0 6 1bp ,编码 6 86个氨基酸。短沟对虾酚氧化酶原推算分子量为 781 5 3Da ,等电点pI为 6 2 5 ;斑节对虾则为 785 81Da ,pI为 5 83。用DNA分析软件分析显示两种对虾酚氧化酶原基因具有高度的同源性 ,二者的碱基和推测的氨基酸序列同源性分别为 93 %和 92 %;对虾与其他节肢动物酚氧化酶原基因的同源性的高低与种类间亲缘关系相关 ;不同种类间酚氧化酶活性中心重要组成部分的 2个铜结合位点、位于铜结合位点内的6个组氨酸以及与铜结合位点相邻的氨基酸序列高度保守。

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