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一种适合普通小麦转基因检测的内标准基因PSG719

文献类型： 中文期刊

作者： 刘易科 1 ; 张菲菲 2 ; 廖玉才 2 ; 赵正喜 2 ; 李和平 2 ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院粮食作物研究所

2.华中农业大学麦类作物分子生物技术实验室

关键词： 普通小麦;内标准基因;PSG719;定量PCR;转基因小麦

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2015 年 23 卷 05 期

页码： 683-689

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用定量PCR检测和分析转基因作物外源基因时,首先需要一种具有种属特异性、品种间不显示等位基因变化和较低拷贝数的内标准基因作为对照。本研究通过生物信息学方法和现有文献,筛选到小麦PSG719基因(Gen Bank登录号:FJ497025.1)具有特异性强以及拷贝数低的特点;基于该基因特异区段设计的引物,对包括硬粒小麦在内的16个物种的定性PCR鉴定和16个不同生态区小麦品种的定量PCR检测结果表明,该基因具有普通小麦的特异性和品种间的稳定性。该基因的定性PCR检测极限为2个拷贝的普通小麦基因组;定量PCR检测极限为2个拷贝,定量极限为5个拷贝;这些极限值在已有的小麦内标准基因中均处于最低水平,证明该基因PCR反应的灵敏度较高,可以对小麦转基因成分含量较低的样品进行检测和定量。以经梯度稀释的小麦基因组DNA为模板,定量PCR标准曲线斜率-3.395,相关系数R2为0.999,表明该基因的定量PCR体系适用转基因小麦样品的定量分析。这些结果表明,普通小麦内标准基因PSG719是一个理想的内标准基因,可以用于转基因小麦的定性和定量检测。本研究为将来转基因小麦标识制度的建立提供了一种可靠的定量检测体系。

  • 相关文献

[1]小麦高分子量麦谷蛋白亚基基因功能标记研究进展. 温亮,龙小玲,周正富,雷振生. 2020

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