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番鸭和鹅细小病毒PCR鉴别方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 季芳 1 ; 张毓金 1 ; 杨增岐 2 ; 宋长绪 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院兽医研究所

2.西北农林科技大学

关键词： 番鸭和鹅细小病毒;鉴别诊断;PCR

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2003 年 24 卷 05 期

页码： 102-104

摘要： 根据基因库中番鸭细小病毒 (MDPV)FM株和鹅细小病毒 (GPV)的 B株的基因序列设计了 3个引物 PVC、MDPVdn、GPVdn,分别用 MDPV-DNA、GPV-DNA、MDPV 尿囊液、GPV尿囊液、鸭瘟病毒尿囊液、传染性喉气管炎病毒尿囊液和无离子水对照 ,以 PVC/ GPVdn和 PVC/ MDPVdn特异引物在同一条件下进行PCR扩增 ,产物经 1 0 g/ L的琼脂糖凝胶电泳分析。在 PVC/ GPVdn系统中 ,MDPV-DNA、MD-PV尿囊液、DP、IL T和无离子水对照无条带 ,其余样品均出现约 460 bp的条带 ,在 PVC/ MD-PVdn系统中 ,只有 MDPV-DNA、MDPV-GPV混合 DNA、MDPV尿囊液中出现约 90 0 bp的条带 ,其余无特异性核酸带 ,对 MDPV-DNA的敏感性达 0 .5pg,对 MDPV尿囊液敏感性为 1 0 0 0EL D50 / 5μL ,对 GPV-DNA的敏感性为 0 .5pg,对 GPV尿囊液敏感性为 1 0 EL D50 / 5μL。分别将不同时间提取 0 .5ng/ μL MDPV-DNA、0 .5ng/μL GPV-DNA、MDPV尿囊液、GPV尿囊液和无离子水对照样 ,以 PVC/ GPVdn和 PVC/MDPVdn特异引物进行 PCR扩增 3次 ,结果稳定。表明该 PCR检测技术可灵敏、快速鉴别番鸭和鹅细小病毒

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