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香蕉束顶病毒海南分离物DNA2编码区的克隆及抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 赵焕阁 1 ; 牛胜鸟 1 ; 彭存智 1 ; 刘志昕 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术研究所

关键词： 香蕉束顶病毒;BBTV DNA2 编码区;融合表达

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2008 年 29 卷 01 期

页码： 33-37

收录情况： CSCD

摘要： 利用PCR方法克隆香蕉束顶病毒海南分离物(Banana bunchy top virus,BBTV-HN)DNA2编码区,将其插入到原核表达载体pGEX-6p-1谷胱苷肽-S-转移酶(GST)基因下游。所得克隆pGEX-HN-B2测序结果表明,插入的DNA2片段为267bp,且表达相位和理论上设计的完全一致。把此重组质粒转化到E.coli Rosetta(DE3)中,经过异丙硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后出现约33Ku融合蛋白质表达条带。为获得特异的血清,切下目的表达条带并免疫兔子。经Western-blotting检测,获取的血清可以和表达的33Ku融合蛋白特异结合,表明已成功获得DNA2编码蛋白的血清。

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