文献类型: 中文期刊
作者: 孙冰冰 1 ; 张伟 2 ; 段红英 2 ; 李伟 2 ; 田涛 2 ; 张力群 2 ;
作者机构: 1.天津市植物保护研究所
2.天津市植物保护研究所;中国农业大学植物病理学系;天津市西青区植物保护站
关键词: 荧光假单胞菌;随机突变;EnvZ/OmpR;双因子系统
期刊名称: 华北农学报
ISSN: 1000-7091
年卷期: 2014 年 29 卷 03 期
页码: 44-48
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 用Mini-Tn5转座子随机突变荧光假单胞菌野生型菌株2P24,得到抗生素2,4二乙酰基间苯三酚(2,4-diacetylphloroglucinol,2,4-DAPG)产量提高的突变体Sesu-25。对转座子侧翼序列分析表明,转座子插入到EnvZ/OmpR双因子系统的反应调节因子ompR基因。克隆得到包含完整EnvZ/OmpR系统,全长约为5.9 kb的DNA片段。该双因子系统中的envZ基因和ompR基因与P.fluorescens F113的envZ基因和ompR基因同源性分别为93%和96%。将ompR基因克隆到表达载体pET-22b(+)中,得到重组表达载体pET-ompR。将pET-ompR转入Escherichia coli BL21中得到重组菌株BL21-ompR,用IPTG诱导表达和亲和柱层析法纯化的OmpR蛋白,经SDS-PAGE电泳分析表明ompR基因得到成功表达和纯化。
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