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乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白原核表达载体的构建与表达

文献类型： 中文期刊

作者： 李鹏成 1 ; 孙冰 2 ; 乔绪稳 2 ; 郑其升 2 ; 侯继波 2 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院

2.江苏省农业科学院,国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 乳酸乳球菌;肽聚糖锚钩蛋白;原核表达

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2013 年 29 卷 06 期

页码： 1399-1404

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(Protein anchor,PA)为研究对象,构建原核表达载体并进行表达,以期获得PA融合蛋白。首先应用PCR技术扩增得到乳酸乳球菌PA基因片段;然后应用pET-32a(+)质粒构建原核表达载体,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,最后进行融合蛋白的纯化及锚定活性鉴定。结果显示:PA融合蛋白在大肠杆菌中获得表达,主要以包涵体形式存在;包涵体经纯化复性后的PA蛋白可与肽聚糖结合。说明乳酸乳球菌PA蛋白在大肠杆菌中可高效表达并具有锚定活性,为今后该蛋白多克隆抗体制备及与目的抗原的融合表达等相关研究奠定了基础。

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