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采用噬菌体展示技术筛选玉米赤霉醇的单链抗体

文献类型： 中文期刊

作者： 张晴晴 1 ; 张晓 1 ; 程罗根 1 ; 刘媛 1 ; 唐敏 1 ; 刘贤进 1 ;

作者机构： 1.南京师范大学生命科学学院;江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所;盐城工学院化学与生物工程学院

关键词： 噬菌体抗体库;单链抗体;玉米赤霉醇

期刊名称： 免疫学杂志

ISSN： 1000-8861

年卷期： 2009 年 06 期

页码： 108-111

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的从噬菌体单链抗体库中筛选玉米赤霉醇(ZER)的阳性克隆。方法人工抗原ZER-BSA作为包被原,采用负筛选,经过连续3轮固相"亲和-洗脱-富集"筛选,富集了噬菌体抗体库中阳性克隆的比例,同时采用Trypsin和ZER竞争洗脱2种洗脱方法。ELISA鉴定阳性克隆,运用SDS-PAGE方法对大肠杆菌分泌蛋白进行了时间条件的摸索。结果随着淘洗轮数的增加,特异性噬菌体抗体得到了高度富集,从6个96孔板的克隆中筛选到10株阳性克隆(阳性大于阴性3倍视为阳性克隆),将菌株转换成功的5株测序发现有4株不同的阳性克隆,对一株进行了原核系统的表达,SDS-PAGE确定了目的条带的存在,相对分子质量为Mr28000。结论为在天然噬菌体抗体库中制备玉米赤霉醇的抗体奠定了基础。

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