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转基因水稻T1C-1 Bt Cry1C基因的克隆、表达、纯化和实质等同性研究

文献类型: 中文期刊

作者: 赵笑 1 ; 任方方 2 ; 王玉炯 1 ; 韩芳婷 2 ; 刘启文 2 ; 吴洋洋 2 ; 胡瑞丽 2 ; 吴潇 3 ; 赵凯 3 ;

作者机构: 1.宁夏大学生命科学学院

2.上海师范大学生命与环境科学学院

3.上海市农业科学院生物技术研究所

关键词: 转基因水稻;Cry1C蛋白;实质等同性;表达;纯化

期刊名称: 上海农业学报

ISSN: 1000-3924

年卷期: 2014 年 30 卷 05 期

页码: 21-27

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 将质粒p ET30a(+)-Cry1C转入大肠杆菌进行表达,对其表达条件进行了优化,并评价了蛋白的表达和纯化效果。结果显示:最佳诱导时间、IPTG的终浓度和诱导温度分别为5 h、0.6 mmol/L和25°C。大多数的靶蛋白以包涵体形式表达,通过纯化和复性,最终获得高纯度有活性的靶蛋白。通过SDS-PAGE Western Blot、糖蛋白测定、LC MS/MS鉴定和杀虫试验表明:大肠杆菌中表达的Cry1C蛋白和转基因水稻的Cry1C蛋白具有实质等同性。

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