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cDNA-AFLP分析方法在中国对虾中的应用

文献类型： 中文期刊

作者： 李吉涛 1 ; 李健 1 ; 陈萍 1 ; 刘萍 1 ; 刘博 1 ; 何玉英 1 ; 王清印 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： AFLP;中国对虾;反应体系

期刊名称： 中国海洋大学学报(自然科学版)

ISSN： 1672-5174

年卷期： 2009 年 39 卷 06 期

页码： 1208-1212

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将cDNA扩增片段长度多态性(cDNA-AFLP)分析方法在中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)中进行了应用,旨在建立1套适于中国对虾研究的cDNA-AFLP反应体系。对总RNA提取、cDNA双链合成、双酶切反应、连接反应、预扩增反应、选择性扩增反应和银染等步骤进行了优化和改进。结果表明,用EcoRⅠ/MseⅠ双酶切、核心序列加3个选择性碱基的选择性扩增引物、1∶1摩尔比的EcoRⅠ端与MseⅠ端选择性扩增引物比和12μL选择性扩增体积,可得到十分稳定的结果,所得产物经电泳和银染后可获得条带清晰的图像。该方法的建立为cDNA-AFLP技术在中国对虾功能基因组研究中的应用奠定了基础。

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