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鱼类病原性弧菌血清学诊断芯片技术构建

文献类型： 中文期刊

作者： 绳秀珍 1 ; 李文涛 1 ; 王欣欣 1 ; 唐小千 1 ; 邢婧 1 ; 战文斌 1 ;

作者机构： 1.中国海洋大学水产动物病害与免疫学实验室;青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室

关键词： 弧菌;抗原芯片;血清学诊断;交叉反应;ELISA;牙鲆

期刊名称： 中国动物检疫

ISSN： 1005-944X

年卷期： 2019 年 12 期

页码： 88-97

摘要： 针对鱼类致病性肠道弧菌(Vibrio ichthyoenteri)、鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、河流弧菌(Vibrio fluvialis)和哈维氏弧菌(Vibrio harveyi),制备了牙鲆(Paralichthys olivaceus)抗血清,提取了各弧菌的外膜蛋白、胞外产物、鞭毛蛋白和全菌蛋白,分析了牙鲆抗血清与各抗原蛋白的免疫反应,发现各弧菌抗血清与各自的抗原反应最强,与其他弧菌抗原有不同程度的交叉反应。将6种弧菌的抗原组分固定于芯片载体形成微阵列,构建了其血清学诊断抗原芯片,使用辣根过氧化物酶标记的抗牙鲆IgM单抗2D8作为检测抗体,确定了检测结果判读方法;将抗原芯片应用于牙鲆和大菱鲆(Scophthalmus maximus)的弧菌病诊断,并利用ELISA技术,验证了该抗原芯片用于弧菌病诊断的准确性。本研究为鱼类弧菌病的血清学诊断提供了有力工具。

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