文献类型： 中文期刊
作者： 余明兴 1 ; 林裕胜 2 ;
作者机构： 1.福建省浦城县动物疫病预防控制中心
2.福建省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 新型鹅星状病毒;RT-PCR;检测
期刊名称： 福建农业学报
ISSN：
年卷期： 2021 年 006 期
页码： 665-669
收录情况： CSCD
摘要： 【目的】建立一种新型鹅星状病毒（New goose astrovirus,NGAstV）的RT-PCR检测方法。【方法】根据ORF2基因序列,利用Oligo 7软件设计并筛选出特异性扩增引物,通过优化扩增条件,建立检测新型鹅星状病毒的RT-PCR方法,对其进行特异性及敏感性检验,并在临床上进行初步应用。【结果】RT-PCR最佳反应体系为:Premix 10μL,ORF2上下游引物浓度10μmol·L-1各1μL,模板3μL,无菌去离子水补足至20μL。最佳反应程序为:94℃2 min;94℃30 s、55℃15 s、72℃15 s,30个循环;72℃10 min。该方法对新型鹅星状病毒能扩增出特异性片段,对其他鹅常见病原无特异性扩增;检测灵敏度为62 fg·μL-1。对45份临床样品进行检测,结果检测出15份阳性样品,阳性率为33.33%。【结论】建立的新型鹅星状病毒RT-PCR方法特异性强、稳定性好,可作为新型鹅星状病毒快速检测和流行病学调查的实用技术。
- 相关文献
[1]猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立和应用. 王劭,陈少莺,林锋强,程晓霞,江斌,陈仕龙,林琳,朱小丽. 2007
[2]猪乙型脑炎病毒RT-PCR检测方法的建立. 车勇良,陈少莺,魏宏,王隆柏,陈仕龙,周伦江,庄向生. 2006
[3]鸡传染性支气管炎病毒RT-PCR检测方法的建立. 程晓霞,王劭,朱小丽,陈仕龙,林锋强,陈少莺. 2009
[4]应用RT-PCR技术检测番鸭呼肠孤病毒. 胡奇林,林锋强,陈少莺,朱小丽,程晓霞,陈仕龙,林天龙,江斌,李怡英,程由铨. 2004
[5]猪传染性胃肠炎病毒RT-PCR检测方法的建立和应用. 王劭,陈少莺,林锋强,程晓霞,江斌,陈仕龙,林琳,朱小丽. 2007
[6]RT-PCR和免疫荧光抗体试验检测猪瘟病毒的比较研究. 俞伏松,车勇良,江斌,吴胜会,林琳,陈少莺,林天龙. 2007
[7]福建省马铃薯纺锤块茎类病毒快速检测及序列分析. 李华伟,罗文彬,纪荣昌,许泳清,张鸿,李国良,刘中华,邱永祥,邱思鑫. 2015
[8]RT-PCR技术检测猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV). 庄向生,车勇良,陈少莺,王隆柏,魏宏,周伦江,陈仕龙. 2007
[9]新型鸭呼肠孤病毒RT-PCR方法的建立与应用. 王劭,陈少莺,陈仕龙,程晓霞,林锋强,朱小丽,江斌,李兆龙. 2011
[10]新型鹅星状病毒FJ-NP株的分离鉴定. 林裕胜,江锦秀,张靖鹏,游伟,胡奇林. 2021
[11]3种鉴别诊断PRRS美洲型传统毒株和变异株的方法比较. 陈仕龙,郑敏,陈少莺,江斌,林锋强,朱小丽. 2011
[12]RT-PCR方法检测猪繁殖障碍与呼吸综合征流行情况. 庄向生,张德明,周伦江,魏宏,王隆柏,刘玉涛. 2003
[13]黄瓜绿斑驳花叶病毒的生物学与分子检测鉴定. 李海明,吴祖建,陈启建,沈建国. 2011
[14]猪流感病毒RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 王隆柏,车勇良,吴学敏,陈如敬,刘玉涛,周伦江. 2014
[15]甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)ELISA鉴定及RT-PCR检测方法的建立. 许泳清,李华伟,刘中华,邱永祥,罗文彬,纪荣昌,汤浩,邱思鑫,余华. 2013
[16]鸭巴泰病毒一步法RT-PCR检测方法的建立. 傅光华,陈翠腾,傅秋玲,刘荣昌,程龙飞,施少华,万春和,陈红梅,黄瑜. 2017
[17]猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法建立及初步应用研究. 吴学敏,陈如敬,王隆柏,车勇良,刘玉涛,庄向生,严山,周伦江. 2012
[18]新型鸭呼肠孤病毒在番鸭体内分布和排毒规律. 林锋强,程晓霞,陈仕龙,王劭,朱小丽,陈少莺. 2018
[19]太子参中芜菁花叶病毒的RT-PCR检测. 黄颖桢,陈菁瑛,朱景花,刘保财,赵云青. 2016
[20]水禽源禽1型副黏病毒强毒RT-PCR方法的建立. 施少华,程龙飞,陈红梅,傅光华,杨维星,黄瑜. 2009
作者其他论文 更多>>
-
基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体TaqMan检测方法的建立及其遗传演化分析
作者：江锦秀;张靖鹏;林裕胜;刘维巍;胡奇林;万春和
关键词：绵羊肺炎支原体;Hsp70基因;TaqMan实时荧光定量PCR方法;序列分析
-
福建省福清市山羊地方性鼻内肿瘤病毒2型感染流行病学调查
作者：张靖鹏;陈芹;刘维巍;陈勇;江锦秀;吴丹;林裕胜;方玉琴;郑晓何;黄守愚;杨陈文;林秀敏;林银娇;胡奇林;毛坤明
关键词：山羊地方性鼻内肿瘤病毒2型;流行病学;福清;qPCR
-
山羊地方性鼻内肿瘤病毒MAb的制备及间接ELISA方法的建立
作者：江锦秀;林裕胜;张靖鹏;游伟;张龙;毛坤明;胡奇林
关键词：山羊地方性鼻内肿瘤病毒;单克隆抗体;间接ELISA
-
牛轮状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用
作者：刘维巍;林裕胜;张龙;江锦秀;张靖鹏;刘庆华;胡奇林
关键词：牛轮状病毒;检测方法;RT-PCR
-
4份临床样品中羊口疮病毒F1L、B2L和GIF基因的进化分析
作者：林裕胜;刘维巍;张龙;江锦秀;张靖鹏;刘庆华;胡奇林
关键词：羊口疮病毒;F1L基因;B2L基因;GIF基因;进化分析
-
福建省部分养殖场鸡圆圈病毒3型病原检测及VP2基因分析
作者：林裕胜;余明兴;陈长福;张龙;江锦秀;张靖鹏;刘维巍;刘庆华;胡奇林
关键词：鸡圆圈病毒3型;VP2基因;流行病学;序列分析
-
2株鸡传染性支气管炎病毒株的分离鉴定及其S1基因遗传进化分析
作者：林裕胜;刘维巍;张龙;江锦秀;张靖鹏;刘庆华;胡奇林
关键词：鸡传染性支气管炎病毒;分离;鉴定;S1基因;序列分析
