文献类型： 中文期刊
作者： 孙盈 1 ; 闫敏鑫 1 ; 黄秀芬 1 ; 孔瑞丽 2 ; 黄金海 3 ; 李永清 1 ;
作者机构： 1.畜禽疫病防控技术北京市重点实验室北京市农林科学院畜牧兽医研究所
2.北京市延庆县农业局
3.天津大学化工学院
关键词： 补体因子C3d;重组杆状病毒;pFB-LIC-Bse;蛋白表达
期刊名称： 中国兽医学报
ISSN： 1005-4545
年卷期： 2015 年 35 卷 08 期
页码： 1254-1259
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为研制鸡体内补体因子C3d抗体的检测方法,采用RT-PCR方法从鸡肝脏组织细胞的总RNA中扩增出1 002bp的鸡补体因子C3d基因全长,然后将其克隆到杆状病毒载体pFB-LIC-Bse中获得重组质粒pFB-C3d。将pFB-C3d转化到带有杆状病毒基因组的DH10Bac感受态细胞中,制备重组杆粒rBacmid-C3d。再将该重组杆粒转染到昆虫细胞sf9中,通过病毒拯救技术构建携带C3d基因的重组杆状病毒。Western blot试验结果表明,重组杆状病毒能在昆虫细胞sf9中表达出大小约为35 000的C3d-his融合蛋白。以该融合蛋白作为抗原建立的Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)显示,经C3d-M2-GST融合蛋白免疫的鸡血清能够与杆状病毒表达的C3d结合,说明本研究构建的重组杆状病毒可以用来检测C3d作为分子佐剂及其融合蛋白免疫鸡后产生针对C3d自身的抗体,为今后建立体内C3d水平监测的指示系统奠定基础。
- 相关文献
[1]猪圆环病毒3型Cap重组鞭毛蛋白融合表达及其免疫原性研究. 姜海军,王丹,郭禹,韦莉,侯磊,王菁,朱珊珊,刘爵. 2023
[2]传染性造血器官坏死病病毒糖蛋白杆状病毒表达系统的构建及其抗原性分析. 谢三磊,温书香,罗琳,马志宏,李桂萍,李铁梁,姜娜,邢薇,孙惠玲. 2017
[3]IHNV核衣壳蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定. 谢三磊,王雯慧,孙惠玲. 2014
[4]传染性造血器官坏死病毒核衣壳蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及鉴定. 谢三磊,孙惠玲,王雯慧. 2014
作者其他论文 更多>>
-
牛传染性鼻气管炎病毒胶体金检测试纸条的研制和评价
作者：刘文晓;张坤;程晶;李永清
关键词：牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV);胶体金检测试纸条;单克隆抗体
-
牛早幼粒细胞白血病蛋白的原核表达及单克隆抗体制备
作者：程晶;陈沛霖;郭禹;崔锦蔷;江波;周林宜;刘文晓;李焕荣;李永清
关键词：牛早幼粒细胞白血病蛋白;原核表达;蛋白纯化;单克隆抗体
-
抗鸡早幼粒细胞白血病蛋白单克隆抗体的制备及其在荧光检测中的应用
作者：曹梦瑶;王晶;周林宜;程晶;李永清;许健;江波;胡格
关键词：早幼粒细胞白血病蛋白(PML);单克隆抗体;核小体(NBs);马立克病病毒(MDV)
-
10种消毒剂对非洲猪瘟病毒的灭活效果
作者：程晶;许健;刘文晓;江波;李永清
关键词：非洲猪瘟病毒;消毒剂;肺泡巨噬细胞;灭活效果
-
牛源多杀性巴氏杆菌主要荚膜群和脂多糖基因型两组三重PCR检测方法
作者：李霄阳;许建;刘文晓;章振华;徐福洲;陈小玲;李永清
关键词：牛源多杀性巴氏杆菌;荚膜群;脂多糖基因型;三重PCR;琼脂扩散试验
-
规模化奶牛场犊牛腹泻的病原检测与分析报告
作者：阮继湘;刘文晓;江波;许健;李永清;程晶
关键词：犊牛腹泻;病原体;抗体;检测
-
鸡补体受体2基因克隆、蛋白表达纯化及其多克隆抗体的制备和鉴定
作者：孔子萌;江波;蔡云虹;何后军;李永清;靳换
关键词：ChCR2基因;蛋白表达和纯化;多克隆抗体;ELISA;间接免疫荧光;Western blotting
