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大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位基因的原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 梁望旺 1 ; 周丹娜 1 ; 刘泽文 1 ; 伍锐 1 ; 杨克礼 1 ; 段正赢 1 ; 邓均华 1 ; 徐涤平 1 ;

作者机构： 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 肠毒素大肠杆菌;不耐热肠毒素;克隆;原核表达

期刊名称： 湖北农业科学

ISSN： 0439-8114

年卷期： 2009 年 48 卷 11 期

页码： 2627-2629

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 大肠杆菌(Escherichia coli)不耐热肠毒素B亚单位(LTB)不仅是重要的黏膜免疫原,而且作为佐剂在黏膜免疫中起着重要的作用。试验采用PCR方法扩增了肠毒素性大肠杆菌的LTB基因,并将其克隆到pGEX-KG原核表达载体上,构建了重组质粒pKG-LTB,经酶切和测序鉴定后,转化到大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,克隆的LTB基因与谷胱甘肽转移酶(GST)基因获得了高效融合表达,表达的融合蛋白GST-LTB分子量约为35kDa,并具有免疫反应活性。这为进一步研究LTB蛋白黏膜免疫原性和黏膜佐剂的作用奠定了基础。

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