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中国对虾部分基因组文库构建和微卫星DNA序列的筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 刘萍 1 ; 孟宪红 1 ; 孔杰 1 ; 李健 1 ; 王清印 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 中国对虾;基因组文库;微卫星DNA

期刊名称： 高技术通讯

ISSN： 1002-0470

年卷期： 2004 年 14 卷 002 期

页码： 87-90

收录情况： EI ; 北大核心 ; CSCD

摘要： 以中国对虾为实验材料,提取肌肉的基因组DNA.经BSP143Ⅰ酶切后,回收500~1000BP的DNA片段,与经BAMHⅠ酶切并去磷酸化的PUC19重组,将重组载体转入大肠杆菌DH5α中.然后将其涂布于含氨苄青霉素的LB平板上,过夜培养后,经蓝白斑筛选,构建对虾部分基因组文库.采用载体质粒的通用引物进行PCR检测插入片段的大小,对基因组文库进一步进行筛选.从建立的文库中选取100个片段大小合适的克隆进行测序,其中54个克隆的DNA插入片段含有微卫星序列,共获得了111个微卫星序列,在GENBANK中注册了12个微卫星序列.本实验中还发现1个含有23BP的小卫星序列.

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