文献类型： 中文期刊
作者： 张雨良 1 ; 黄启星 1 ; 张树珍 1 ; 王健华 1 ; 余乃通 1 ; 刘志昕 1 ;
作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词： 高粱花叶病毒;Hcpro;CP;PIPO;酵母双杂交;诱饵载体
期刊名称： 热带作物学报
ISSN： 1000-2561
年卷期： 2012 年 33 卷 12 期
页码： 2252-2256
收录情况： CSCD
摘要： 采用同源克隆技术获得侵染甘蔗高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)的Hcpro、CP、PIPO基因片段。将该基因片段连接至pGBKT7载体,分别构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Hcpro、pGBKT7-CP和pGBKT7-PIPO,经PCR、酶切及测序鉴定,证明重组诱饵载体构建成功后,将重组质粒导入Y2H Gold酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性。含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Leu、SD/-Trp/-Ade和SD/-Trp/-His营养缺陷平板上不能生长,表明重组诱饵质粒表达产物对ADE2、HIS3报告基因无自激活作用。研究结果为下一步利用酵母双杂交系统检测与高粱花叶病毒Hcpro、CP、PIPO蛋白相互作用的甘蔗蛋白提供基础。
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