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豆梨半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因的克隆及胁迫表达

文献类型： 中文期刊

作者： 李慧 1 ; 丛郁 2 ; 常有宏 1 ; 蔺经 1 ; 盛宝龙 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院园艺研究所

2.中国科学院南京土壤研究所

关键词： 豆梨;半胱氨酸蛋白酶抑制剂;基因;克隆;表达

期刊名称： 西北植物学报

ISSN： 1000-4025

年卷期： 2011 年 31 卷 05 期

页码： 7-13

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用RT-PCR结合RACE技术,从中国梨砧木——豆梨成熟种子中克隆获得豆梨半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因(PcCPI)的cDNA全长序列,并通过半定量RT-PCR分析不同胁迫处理对该基因表达水平的影响.结果表明:(1)PcCPIcDNA序列长度为980 bp,开放阅读框78~812 bp,编码的多肽由信号肽(29个氨基酸)和成熟肽(216个氨基酸)组成,具有3个植物半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因家族的高保守特征序列模式——LARFAVQEHN、QX-VXG和YQAKVWVKPW.(2)该蛋白与蔷薇科植物的CPI蛋白处于系统发育树的同一分支,且与苹果CPI蛋白的一致性最高(95.9%).(3)半定量RT-PCR结果显示:PcCPI基因在豆梨叶片中为诱导型表达,在人工模拟逆境条件下(包括喷施50μmol/L MeJA或100μmol/L ABA、刀片2次机械损伤2、00 mmol/L NaCl胁迫、4℃低温或30℃高温胁迫)处理4 h后,豆梨叶片中PcCPI基因表达量明显上升,表明该基因参与了豆梨对生物或非生物胁迫的防御机制.

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