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非变性原位杂交技术在芝麻染色体识别上的探索与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 刘艳阳 1 ; 崔承齐 1 ; 梅鸿献 1 ; 武轲 1 ; 郑永战 1 ;

作者机构： 1.河南省农业科学院/河南省芝麻研究中心

关键词： 芝麻;寡聚核苷酸;染色体;核型;ND-FISH

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2013 年 46 卷 17 期

页码： 3729-3735

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】研究和确定芝麻ND-FISH最优试验条件,并对其在芝麻染色体识别中的可行性进行探索。【方法】以寡聚核苷酸(AC)8为探针,研究不同洗脱强度、酶解时间和杂交时间对ND-FISH的影响,确定芝麻ND-FISH最优试验方案。【结果】芝麻ND-FISH最优方案:制片在浓度100μg·mL-1RNase A酶解1h,探针浓度6μL(20 ng·μL-1),杂交4 h,4×SSC/0.2%Tween 20溶液洗脱10 min;18条染色体存在(AC)8杂交信号,其中,14条染色体上存在较强杂交信号,4条染色体上有较弱杂交信号,结合染色体长度及臂比,18条染色体可有效识别。【结论】利用ND-FISH技术、以(AC)8为探针成功识别栽培芝麻的18条染色体。

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