文献类型： 中文期刊

作者： 职爱民 ¹ ; 刘庆堂 ¹ ; 李青梅 ¹ ; 杨苏珍 ¹ ; 柴书军 ¹ ; 赵东 ¹ ; 张志杰 ² ; 邓瑞广 ¹ ; 张改平 ¹ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室

2.河南花花牛乳业股份有限公司

关键词： 环丙沙星;半抗原;单克隆抗体;杂交瘤;免疫学特性

期刊名称： 中国农学通报

ISSN： 1000-6850

年卷期： 2010 年 26 卷 18 期

页码： 12-16

收录情况： 北大核心

摘要： 用EDC法将BSA和OVA分别和环丙沙星(Ciprofloxacin,CIP)偶联作为免疫原和包被原,并经紫外扫描(UVScan)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。用合成的BSA-CIP免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、敏感的小鼠进行抗原超强免疫;取其脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌CIP单克隆抗体的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备CIPmAb,对CIPmAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定表明BSA-CIP人工抗原偶联成功;免疫的3只小鼠血清抗体效价均达到10-4;其中2号小鼠血清CIP抑制效价较高且IC50最低,达48.59μg/L,融合后筛选出Z3G12B3和Z2H8C10两株敏感特异的杂交瘤细胞,其两株细胞培养上清液效价为1:512,腹水效价为1:2.56×105,Z3G12B3株对CIP的IC50为2.47μg/L,与二氟沙星、沙拉沙星有小于0.03%的交叉反应性,与其他抑制物无交叉反应性。该试验获得了高效价、敏感、特异的抗CIPmAb,为CIP残留ELISA检测试剂盒和试纸条的建立奠定了坚实的基础。