文献类型： 中文期刊
作者： 张永富 1 ; 马国文 1 ; 刘月焕 2 ; 刘永宏 2 ; 李明刚 3 ; 张秋雨 3 ; 刘锋 3 ;
作者机构： 1.内蒙古民族大学动物科技学院
2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所
3.北京庄笛浩禾生物医学科技有限公司
关键词： 猪繁殖与呼吸综合征病毒;ORF7基因;原核表达载体
期刊名称： 中国动物检疫
ISSN： 1005-944X
年卷期： 2008 年 25 卷 12 期
页码： 25-27+30
摘要： 根据GenBank中美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因序列,设计合成一对引物,应用RT-PCR方法扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因(N基因)。将所扩增片段克隆入原核表达载体pET-32a(+),pET-ORF7重组质粒转化DH5a宿主菌后,经双酶切、PCR鉴定后挑选阳性克隆测序鉴定并对插入的ORF7基因序列进行分析。结果表明,ORF7基因的原核表达载体构建成功。ORF7基因序列与美洲型的ORF7基因核苷酸同源性为92.8%～99.7%,与LV株的相应基因核苷酸同源性为65.3%;推导的氨基酸与美洲型相应基因的同源性为92.0%～99.2%,与LV株的同源性为65.3%,系统进化树表明该PRRSV属于美洲型。本研究为N蛋白的进一步研究和制备诊断性抗原奠定了基础。
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