文献类型: 中文期刊
作者: 李小宇 1 ; 张春雨 1 ; 郭东全 1 ; 张淋淋 2 ; 尤晴 3 ; 董英山 1 ; 王永志 1 ; 李启云 1 ;
作者机构: 1.吉林省农业科学院植物保护研究所
2.东北农业大学植物保护学院
3.吉林农业大学农学院
关键词: Bar;双抗夹心酶联免疫吸附;大豆;检测
期刊名称: 食品科学
ISSN: 1002-6630
年卷期: 2016 年 37 卷 04 期
页码: 222-225
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为快捷有效地检测转Bar基因抗除草剂大豆,利用已制备的抗除草剂Bar基因编码蛋白,膦丝菌素乙酰转移酶(phosphinothricin acetyltransferase,PAT)单克隆抗体和多克隆抗体,建立PAT蛋白双抗夹心酶联免疫吸附检测方法,对转Bar基因抗除草剂大豆不同组织材料进行定量检测。结果显示,最佳检测条件为捕获抗体质量浓度0.125μg/m L,包被酶标板,37℃孵育1 h后4℃静置过夜,检测样品37℃孵育1.5 h,检测抗体质量浓度6.25μg/m L,37℃孵育1.5 h;PAT蛋白的最低检测限为0.04 ng/m L,大豆蛋白体系中为8 ng/m L;重复性变异系数小于3%。利用上述检测条件,对实验建立的转Bar基因抗除草剂大豆进行PAT蛋白定量检测,成功地在根、茎、花、叶、种子不同部位检测到该蛋白的表达。
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