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猪流感病毒抗原表位基因表达载体构建与免疫原性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 刘惠莉 1 ; 邢继兰 1 ; 潘洁 1 ; 杨秋峰 1 ; 赵艳敏 1 ;

作者机构: 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

关键词: 猪流感病毒;抗原表位;新型疫苗

期刊名称: 生物工程学报

ISSN: 1000-3061

年卷期: 2008 年 24 卷 04 期

页码: 167-171

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据猪流感病毒血凝素蛋白基因(Heamuglutinine,HA)的核苷酸序列,设计、筛选HA蛋白氨基酸序列的主要表位多肽4个,将4个片段以柔性连接串联成模拟蛋白,核苷酸约为300 bp,体外扩增该模拟蛋白基因,插入到原核表达载体pET30a(+)中,转染宿主菌诱导表达,结果获得分子量为20 kD的表达蛋白,该蛋白可与抗His-tag抗体、抗猪流感病毒H1N1、H3N2亚型高免血清发生免疫学反应。纯化后免疫小鼠,ELISA及血凝抑制(Heamuglutinine inhibitor,HI)试验检测,小鼠产生针对多肽抗原的血清抗体,同时还可检测到H1N1、H3N2亚型SIV血凝抗体。流氏细胞仪检测免疫组外周血淋巴细胞高于对照组,说明该模拟蛋白具有与H1N1、H3N2亚型猪流感病毒相似的免疫原性及反应原性,为H1N1、H3N2血清亚型猪流感病毒疫苗研制提供了新手段。

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