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七带石斑鱼神经坏死病毒的RT-LAMP检测方法

文献类型： 中文期刊

作者： 刘滨 1 ; 刘新富 1 ; 曾霖 2 ; 孟振 1 ; 刘江春 3 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院

2.浙江海洋学院

3.莱州明波水产有限公司

关键词： 七带石斑鱼;神经坏死病毒;检测;RT-LAMP

期刊名称： 天津农业科学

ISSN： 1006-6500

年卷期： 2016 年 22 卷 07 期

页码： 23-28

摘要： 报道了一种可以快速、灵敏地检测七带石斑鱼神经坏死病毒(NNV)的逆转录环介导等温扩增方法(RT-LAMP)。该方法参考赤点石斑鱼NNV病毒的主衣壳蛋白(MCP)基因的保守序列,设计1对引物克隆出七带石斑鱼NNV的基因序列,利用Primer Explorer V4软件设计了3对针对所克隆NNV基因序列的特异性引物,建立了RT-LAMP的反应体系,并分别对反应系统的引物浓度、反应温度和时间进行了优化,形成了七带石斑鱼NNV病毒RT-LAMP检测技术。实践应用结果表明,在63℃的最佳反应温度下,采用RT-LAMP检测技术经过45 min就能完成一次检测,准确率达到100%。本研究建立的RT-LAMP检测NNV技术设备要求简单,为七带石斑鱼等石斑鱼无NNV受精卵和仔稚鱼的生产现场检测和筛选提供了一种方便、灵敏的检测方法。

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[1]神经坏死病毒对卵形鲳鲹的致病性及外壳蛋白基因序列分析. 许海东,OU You-jun,区又君,郭志勋,苏友禄,王瑞旋. 2010

[2]赤点石斑鱼神经坏死病毒MCP基因原核表达条件优化. 苏友禄,冯娟,孙秀秀,郭志勋,闫云锋,黄剑南. 2009

[3]石斑鱼神经坏死病毒RNA干扰的转染条件优化与效果分析. 黄桂菊,喻达辉,柳明,潘俐玲,王晓宁. 2011

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[6]神经坏死病毒MCP重组疫苗对军曹鱼稚鱼的免疫保护. 苏友禄,郭志勋,冯娟,闫云锋,黄剑南. 2009

[7]石斑鱼神经坏死病毒RNA干扰的. 黄桂菊,喻达辉,柳明,潘俐玲,王晓宁,曾令兵,龙华. 2011

[8]卵形鲳鲹一例疑似神经性病毒病的初步分析. 蔡小辉,文雪,徐力文,贾友宏,梁志辉,王志成. 2012

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[10]斜带石斑鱼神经坏死病毒CP基因shRNA干扰载体的构建及效果评价. 黄桂菊,陈健光,喻达辉,曾令兵,龙华. 2012

[11]一起卵形鲳鲹幼鱼死亡原因的调查. 王江勇,郭志勋,黄剑南,冯娟. 2006

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[13]鱼类传染性造血器官坏死病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用. 刘淼,徐黎明,卢彤岩,赵景壮,曹永生,刘红柏,尹家胜,张金凤,冯剑. 2014

[14]七带石斑鱼和云纹石斑鱼幼鱼在封闭循环水条件下的生长特性. 宋振鑫,陈超,吴雷明,李炎璐,王鲁,翟介明. 2014

[15]盐度对七带石斑鱼胚胎发育和卵黄囊仔鱼生长的影响. 赵明,陈超,柳学周,庄志猛,徐永江,薛宝贵,杨志,王妍妍,曲江波. 2011

[16]七带石斑鱼染色体核型研究. 钟声平,陈超,王军,刘志鸿,柳淑芳,朱玲,庄志猛. 2010

[17]七带石斑鱼繁殖群体“突眼”症病原菌的分离与鉴定. 陈超,程波,于宏,王印庚,杨志. 2010

[18]超低温冷冻保存对七带石斑鱼胚胎酶活性的影响. 姜静,田永胜,翟介明,陈松林. 2014

[19]云纹石斑鱼(♀)×七带石斑鱼(♂)杂交F_1形态特征与其亲本子代的比较分析. 李炎璐,陈超,王清印,吴雷明,宋振鑫,翟介明,奥谷 亮,大田 智. 2014

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