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小麦1B/1R易位系中有活性的ω黑麦碱基因的启动子的克隆与功能验证

文献类型: 中文期刊

作者: 柴建芳 1 ;

作者机构: 1.河北省农林科学院遗传生理研究所/河北省植物转基因中心

关键词: 小麦;1B/1R易位系;ω-黑麦碱;启动子克隆;功能验证

期刊名称: 农业生物技术学报

ISSN: 1674-7968

年卷期: 2011 年 19 卷 03 期

页码: 91-96

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 小麦1B/1R易位系由于具有高产和适应性广等优点,在我国的小麦生产中得到了广泛的应用,但这类品种有一个共同的缺点,就是加工品质比较差,ω-黑麦碱被认为是影响其加工品质的一个重要因素。通过RNA干扰途径沉默ω-黑麦碱基因的表达,是改良小麦1B/1R易位系加工品质的一个重要策略。使用由ω-黑麦碱基因自身启动子驱动的RNA干扰表达载体,可使转入的基因在需要的部位和需要的时间表达,提高分子育种的效果。为获得有活性的ω黑麦碱基因的启动子,本研究设计了覆盖启动子区和部分编码区的一对特异引物,以小麦(Triticumaestivum)1B/1R易位系兰考906为试材,通过PCR克隆得到了与3个有转录活性的ω-黑麦碱基因有对应关系的5个启动子A9-1、H2-1、H7-1、C11和F11-1,选择与其中2个有转录活性的ω-黑麦碱基因分别有对应关系的启动子A9-1和F11-1构建以GUS为标记基因的表达载体,并用基因枪对小麦幼嫩种子进行了轰击,通过对GUS基因的瞬时表达分析,证实其中一个启动子F11-1具有活性。研究结果为构建由ω黑麦碱基因自身启动子驱动的RNA干扰表达载体提供了基础资料。

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