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三疣梭子蟹PtDNMT1基因的克隆及其在低盐适应中的表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 环朋朋 1 ; 吕建建 1 ; 孙东方 1 ; 高保全 1 ; 刘萍 1 ;

作者机构: 1.上海海洋大学水产与生命学院;农业农村部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所;青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室

关键词: 三疣梭子蟹;PtDNMT1;盐度胁迫;基因克隆;基因表达

期刊名称: 渔业科学进展

ISSN: 2095-9869

年卷期: 2019 年 01 期

页码: 92-100

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 甲基转移酶是维持基因组甲基化状态的重要基因,本研究利用SMART-RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)甲基转移酶基因(PtDNMT1)。PtDNMT1基因cDNA序列全长5919 bp,包括4832 bp的开放阅读框,编码1610个氨基酸,预测分子量为148.15 kDa,理论等电点为4.68。结构预测发现,Pt DNMT1有2个特殊的结构域,分别是锌指结构域(zf-CXXC)和甲基转移酶家族特有的Dcm结构域。进化树分析显示,PtDNMT1基因与昆虫类的DNMT基因聚为一支。组织表达分析发现,PtDNMT1基因在肝胰腺、鳃、卵巢、肌肉、胃、心脏、血液中均有表达,其中在肝胰腺中表达最高,卵巢和鳃次之。进一步研究了低盐胁迫后PtDNMT1基因在鳃、肝胰腺和肌肉组织中的表达变化规律为胁迫6 h时鳃组织中PtDNMT1基因的表达即达到峰值(5.3倍),并一直持续到12 h (4倍),随后逐步下降,在72 h时仍显著高于对照组(2.3倍);PtDNMT1基因在肝胰腺中的表达规律类似于鳃,然而其达到峰值的时间稍晚于鳃(24 h),且上调倍数高于鳃(8倍);低盐胁迫后Pt DNMT1基因在肌肉中的表达最初呈现下调趋势,之后(24h)上调表达至峰值(2.2倍),且一直上调表达至72 h。本研究首次克隆了PtDNMT1基因,根据其在各组织中的表达分布特征以及盐度胁迫后的表达变化情况,推测DNA甲基化在三疣梭子蟹低盐适应中发挥了重要作用。

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