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花生抗黄曲霉相关ARAhPR10基因克隆及其原核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 谢纯政 1 ; 梁炫强 1 ; 李玲 2 ; 刘海燕 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院作物研究所

2.华南师范大学生命科学学院

关键词： 花生;黄曲霉;ARAhPR10基因;原核表达

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2009 年 28 卷 02 期

页码： 35-42

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 花生黄曲霉污染已成为制约我国花生及花生制品出口贸易的关键因素。基于花生抗黄曲霉相关EST序列,RT-PCR法克隆花生ARAhPR10基因(gb|EU661964.1),开放读码框471bp,编码157个氨基酸,分子量16.9kD,等电点5.03。与已报导AhPR10(gb|AY726607)相似性为49.3%。推导氨基酸序列含有PR10家族的高度保守"P-loop"基序(G*GG*G)和Betv1保守疏水结构域"GVALP PTAEK ITFET KLVEG PNGGSIGKLT LKY",推测ARAhPR10是该花生PR10家族的新成员。其基因组扩增序列长度561bp,两个外显子间存在一个长度为87bp的内含子。原核表达ARAhPR10的融合蛋白约25kD,Ni+-NTA树脂亲和纯化后获得电泳单一条带。纯化的ARAhPR10融合蛋白具有体外核酸酶活性,预测其具有抗黄曲霉活性。该基因的克隆及其原核表达融合蛋白的获取为ARAhPR10功能研究奠定了基础。

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