文献类型： 中文期刊
作者： 黄菁 1 ; 朱志伟 1 ; 陈晓宇 1 ; 于福先 1 ; 潘建治 1 ;
作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 卵清蛋白基因;调控序列;载体;荧光素酶活性
期刊名称： 浙江农业学报
ISSN： 1004-1524
年卷期： 2016 年 28 卷 03 期
页码： 412-419
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 卵清蛋白(ovalbumin)基因在鸡基因组中只有一对等位基因,却能每天合成分泌多达2 g的蛋白,占据卵白蛋白质的50%以上,是外源基因载体表达调控构件的首选。该研究从输卵管特异性启动子方面着手,通过对卵清蛋白基因启动子的筛选优化,找出启动子增强因子的位置以及组织特异性区域。将卵清蛋白基因上游-922~-2 073和-2 801~-3 100区域平均分成12个长度约为150 bp的序列,分别插入到-921~+38序列的上游,成功构建12个系列表达载体,为进一步筛选短缩版优化启动子提供材料;卵清蛋白基因第一内含子区域截断成300 bp左右的迷你内含子序列,成功构建8个迷你内含子系列载体,为筛选优化的迷你内含子提供必要的材料;成功分离鸡输卵管上皮细胞并优化电转染条件,通过荧光素酶活性检测初步筛选出具有最强活性重组质粒pGL4-UP-1412和内含子重组质粒pGL4-mini-intron-3,同时推断出若干包含增强子序列区域。
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