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枯草芽孢杆菌224 yplQ基因敲除及其对溶血性的影响

文献类型: 中文期刊

作者: 喻江 1 ; 范国权 2 ; 李璐 1 ; 王旭达 3 ; 李琬 1 ; 李景鹏 1 ;

作者机构: 1.东北农业大学生命科学学院

2.黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木所

3.辽宁省农业科学院大连生物技术研究所

关键词: 枯草芽孢杆菌224;yplQ基因;溶血性

期刊名称: 东北农业大学学报

ISSN: 1005-9369

年卷期: 2010 年 41 卷 07 期

页码: 80-84

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了确定枯草芽孢杆菌224(Bacillus subtilis 224,BS224)的溶血基因或引起溶血的主效基因,以枯草芽孢杆菌224基因组DNA为模板,用PCR方法分别扩增yplQ基因上游约1.0 kb和yplQ基因下游0.5 kb两段DNA序列,并以携带新霉素抗性基因的重组质粒pMD18-T-neo为骨架,构建基于yplQ基因位点的基因阻断质粒pMD18-T-neo-yplQ,线性化后电转化至枯草芽孢杆菌224,通过新霉素抗性平板得到36个neor抗性转化子,基因组PCR鉴定和核苷酸测序证明,确定yplQ18为yplQ基因缺失菌株,将其接种到5%的绵羊血琼脂平板上进行溶血性检测,仍能引起溶血。结果表明,单独敲除枯草芽孢杆菌224染色体上yplQ基因对菌株的溶血性无影响或影响不大。

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