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基于SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR建立生乳及乳制品沙门氏菌快速检测技术

文献类型： 中文期刊

作者： 张巧艳 1 ; 陈亭亭 2 ; 陈笑芸 1 ; 杨胜利 2 ; 缪青梅 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院农产品质量标准研究所

2.浙江工业大学药学院

关键词： 沙门氏菌;荧光定量PCR;SYBR Green Ⅰ;DNA提取;生乳;乳制品

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2012 年 24 卷 05 期

页码： 914-921

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 生乳易受沙门氏菌污染,并大量繁殖;经加工的乳制品细菌数大大减少,但仍存在沙门氏菌污染的风险。试验按生乳及乳制品沙门氏菌污染水平研究样品前处理方法,采用煮沸裂解法快速提取总DNA,针对沙门氏菌invA基因建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR快速检测技术。建立的方法具有良好的特异性和较高的灵敏度,其中生乳沙门氏菌检出限为102cfu.mL-1,方法的检测线性范围为102～108cfu.mL-1,相关系数(R2)为0.999,扩增效率为103%;乳制品沙门氏菌经16 h增菌后检出限达到1 cfu.[25 g(mL)]-1。该技术可用于生乳中沙门氏菌的高效筛查及定量检测,检测一个样品仅需3 h;同时,可用于乳制品的准确定性检测,检测周期为1 d;且方法重复性好、准确度高、操作简单,为乳制品企业快速检测沙门氏菌提供了有效的技术手段。

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[1]基于SYBRGreenI荧光定量PCR建立生乳及乳制品沙门氏菌快速检测技术. 张巧艳,陈亭亭,陈笑芸,杨胜利,缪青梅. 2012

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