文献类型： 中文期刊

作者： 方剑玉 ¹ ; 朱文豪 ² ; 郭小参 ² ; 白献晓 ² ; 李海利 ² ; 徐引弟 ² ; 郎利敏 ² ; 王治方 ² ; 王克领 ³ ;

作者机构： 1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所;南京农业大学动物医学院;普莱柯生物工程股份有限公司

2.;河南省农业科学院畜牧兽医研究所;南京农业大学动物医学院;普莱柯生物工程股份有限公司

3.;河南省农业科学院畜牧兽医研究所;南京农业大学动物医学院;普莱柯生物工程股份有限公司;

关键词： 猪Viperin蛋白;重组腺病毒;抗病毒活性;猪繁殖与呼吸综合征病毒

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2017 年 09 期

页码： 126-131

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究猪Viperin蛋白对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)复制的抑制作用,通过RTPCR方法扩增猪Viperin基因,并克隆入腺病毒穿梭载体p Ad Track-CMV,经菌液PCR、酶切鉴定后进行测序。将PmeⅠ内切酶线性化的重组穿梭载体质粒(p Ad Track-s VIP)电转化大肠杆菌BJ5183,与腺病毒骨架载体p Ad Easy-1进行同源重组,提取重组后的腺病毒质粒,经内切酶PacⅠ线性化后转染HEK-293A细胞,装配成完整的病毒粒子r Ad-s VIP。重组腺病毒r Ad-s VIP感染细胞后,可见绿色荧光蛋白的表达。RT-PCR、Western blot检测结果表明,重组腺病毒r Ad-s VIP可正确表达猪Viperin蛋白,且表达的猪Viperin蛋白具有良好的反应原性,对PRRSV的复制具有明显的抑制作用。