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乳房链球菌透明质酸合成酶基因缺失株的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 郑六海 1 ; 吴杰 2 ; 李双洁 1 ; 张金秋 3 ; 苗晋锋 1 ;

作者机构： 1.南京农业大学动物医学院

2.长沙市动物卫生监督所

3.江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 乳房链球菌;透明质酸合成酶;同源重组;基因敲除

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2015 年 47 卷 07 期

页码： 21-25

收录情况： 北大核心

摘要： 为构建乳房链球菌(Streptococcus uberis)透明质酸合成酶(has A)基因缺失株,采用PCR方法分别扩增氯霉素抗性基因及乳房链球菌has A基因上游、下游片段并克隆到温敏自杀载体p SET4s中,构建重组载体p EST4s:has A。然后,用电转化方法将p EST4s:has A导入乳房链球菌0140J感受态细胞中,通过同源重组获得has A基因敲除突变株。PCR和酶切结果均表明has A基因已被氯霉素抗性基因替换。本研究成功构建了乳房链球菌has A基因缺失株,为进一步探讨has A基因功能及乳房链球菌的致病机理奠定基础。

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