文献类型： 中文期刊

作者： 尹文竹 ¹ ; 许泽玉 ¹ ; 邓碧华 ¹ ; 马芳 ¹ ; 周明旭 ¹ ; 王海燕 ¹ ; 卢宇 ¹ ; 张金秋 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所国家兽用生物制品工程技术研究中心;江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地;南京农业大学动物医学院

关键词： 壳聚糖;吗啉环;水溶性;H7N9禽流感病毒;佐剂

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2023 年 43 卷 08 期

页码： 1618-1626

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在合成一种直接溶解在生理缓冲溶剂中、可注射的功能化修饰的壳聚糖衍生物作为兽用佐剂，用于替代铝盐佐剂。壳聚糖中的氨基与环氧丙基三甲基氯化铵(GTA)中的环氧基团发生加成开环反应，偶联成CS-GTA中间体；再与4-(2-氯乙基)吗啉(ML)发生氮烷基化反应生成终产物CS-GTA-ML。产物通过FI-IR、~1H NMR、Zeta电位等表征手段检测其结构及重要成分的嫁接率；通过溶血试验、细胞活性计数(CCK-8)和组织病理分析(HE)方法评估了CS-GTA-ML的生物安全性，为注射剂型的使用提供了安全保障；配伍H7N9亚型流感灭活病毒，对雌性ICR小鼠和SPF鸡进行皮下免疫，测定对其血凝抑制(HI)效价，并通过流式分析仪初步探索脾淋巴细胞活化能力。结果显示，作为抗原递送系统，CS-GTA-ML在不同pH值的水溶液中均可溶解，其中GTA和ML的嫁接率分别约为53%,15%,且带有15.8 mV的正电荷。当质量浓度在1 g/L以下时，体外脾细胞存活率在88%以上，且对机体重要组成器官无损伤；当质量浓度高达10 g/L时，体外红细胞溶血率仅0.5%左右，具有良好的生物相容性。与单一的H7N9疫苗和ISA206+H7N9疫苗对比，CS-GTA-ML有显著的血凝抑制作用。通过相关细胞因子及流式细胞分析发现CS-GTA-ML倾向于CD4~+T细胞分化趋势，具有体液免疫和细胞免疫双重免疫效力。