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胸膜肺炎放线杆菌纳米PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 张昆丽 1 ; 席振军 1 ; 徐民生 1 ; 李艳 1 ; 勾红潮 1 ; 楚品品 1 ; 蔡汝健 1 ; 李春玲 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

关键词： 胸膜肺炎放线杆菌;纳米PCR;检测方法

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年 31 卷 002 期

页码： 114-119

摘要： 为了建立一种高效、灵敏的胸膜肺炎放线杆菌(APP)检测方法,本研究针对APP的血清型保守基因-毒素4(APxⅣ)序列合成特异性引物,通过优化引物浓度、退火温度等建立了APP纳米PCR检测方法.敏感性试验结果显示,该纳米PCR对APP的检测下限为1×102 CFU/mL,其灵敏度是普通PCR的10倍;特异性结果显示,该方法仅从APP核酸样品可检测到约417 bp的特异性目的条带,而对猪链球菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、沙门菌、金色葡萄球菌等其他病原的检测结果均为阴性;应用本研究建立的纳米PCR技术检测了41份临床疑似APP感染病料,结果显示常规PCR和纳米PCR检测APP阳性率分别为17.07%(7/41)和19.51%(8/41).以上结果表明,本研究成功建立的APP纳米PCR检测方法敏感性高、特异性好,可用于APP感染的临床诊断及流行病学调查.

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