文献类型： 中文期刊

作者： 石晓玉 ¹ ; 张元鹏 ² ; 乔绪稳 ² ; 于晓明 ² ; 陈瑾 ² ; 姜平 ² ; 郑其升 ² ; 侯继波 ³ ;

作者机构： 1.南京农业大学动物医学院;国家兽用生物制品工程技术研究中心

2.;南京农业大学动物医学院;国家兽用生物制品工程技术研究中心

3.;南京农业大学动物医学院;国家兽用生物制品工程技术研究中心;

关键词： 脑膜炎球菌PorB蛋白;猪伪狂犬弱毒疫苗;免疫增强

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2017 年 02 期

页码： 353-360

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 探讨原核表达的重组脑膜炎球菌外膜蛋白PorB对猪伪狂犬弱毒活疫苗免疫的增强效果。将Gen Bank公布的脑膜炎球菌外膜蛋白PorB基因克隆到原核表达载体pQZⅢ中,命名为pQZ-PorB质粒,转入大肠杆菌BL21中表达重组蛋白。采用SDS-PAGE、Western-blot技术和Ni~(2+)-NTA柱鉴定并纯化重组蛋白。将每份含100μg剂量的重组PorB蛋白与猪伪狂犬弱毒疫苗混合后分别滴鼻免疫3日龄仔猪和肌肉注射免疫50日龄猪,同时设PBS对照组和免疫前对照组。免疫28 d后测定IgG和IgA抗体水平、猪外周血淋巴细胞增殖情况以及细胞因子(IFN-γ、IL-10、IL-6)的表达水平。SDS-PAGE和Western-blot结果表明,PorB基因在大肠杆菌中表达,表达的重组PorB蛋白是可溶性的,Ni~(2+)-NTA柱能够有效纯化重组蛋白。重组PorB蛋白不但能够刺激免疫猪在较短时间内产生的较高血清IgG抗体、黏膜IgA抗体和中和抗体,而且可以通过诱导机体产生IFN-γ和IL-6来促进细胞免疫反应。在猪伪狂犬弱毒疫苗免疫中,重组PorB蛋白可以作为一种优良的免疫增强剂。