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栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒巢式PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李晨 1 ; 王崇明 1 ; 曲朋 1 ; 黄倢 1 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 栉孔扇贝;急性病毒性坏死病毒;巢式PCR

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2013 年 37 卷 02 期

页码： 124-130

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为更好地实现对养殖海区栉孔扇贝急性病毒性坏死病毒(acute viral necrosis virus,AVNV)的快速诊断和分子流行病学的调查,以及AVNV的疫情监测,选择AVNV全基因组序列中的保守区段,应用Accelrys gene 2.5软件设计一对巢式引物,用于AVNV的检测。结果显示,引物的扩增片段分别为979和548 bp。实验优化了PCR体系中Mg2+和dNTPs浓度及扩增程序中的退火温度,并建立了完善的AVNV巢式PCR检测技术。研究表明,该PCR检测技术具有较高的敏感性,可稳定检测出5 pg扇贝样品组织总核酸中5×10 copies的病毒粒子。

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