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异硫氰酸荧光素标记鳗弧菌条件优化及应用条件对荧光信号的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 王锐 1 ; 王秀华 2 ; 王玉娟 2 ; 韩雯 2 ; 黄健 2 ;

作者机构： 1.中国海洋大学海洋生命学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所

关键词： 鳗弧菌;异硫氰酸荧光素;荧光标记;标记条件

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2014 年 38 卷 04 期

页码： 132-139

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了实现对目标细菌的有效示踪,实验以异硫氰酸荧光素(FITC)为标记物,分别设置FITC标记浓度0.2、2、20、50、100、200μg/mL,标记时间1、15、30、60、120、240 min,研究了FITC标记浓度与标记时间对鳗弧菌标记效果的影响,同时对在不同温度(25、4、-20、-70℃)及不同时间(24、48、96、192 h)存储条件下鳗弧菌标记荧光的稳定性进行了比较,对标记鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光变化进行了观察,研究了不同光照条件(0、150、1 500、25 000 lx)对标记鳗弧菌的荧光衰减影响,以及在-20和-70℃条件下反复冻融对标记鳗弧菌荧光强度的影响。结果表明,FITC的最适标记浓度范围为20~100μg/mL,最适标记时间范围60~120 min,储藏在-20和-70℃条件下,标记后的鳗弧菌荧光信号比储藏在4和25℃条件下稳定,标记后的鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光信号稳定性优于对照组,不同强度自然光照对标记鳗弧菌的荧光衰减效果不明显,标记细菌经3次冻融,发现在-70℃条件下冻存的细菌荧光信号稳定性保持良好。本研究结果为FITC用于标记海洋细菌提供了实用的技术参数。

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