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适于基因组测序的高纯度的大豆线粒体基因组DNA提取方法

文献类型: 中文期刊

作者: 李玉秋 1 ; 张春宝 1 ; 赵洪锟 1 ; 谭化 1 ; 费晓燕 1 ; 赵丽梅 1 ; 董英山 1 ;

作者机构: 1.吉林省农业科学院大豆研究所

关键词: 大豆;mt DNA;差速离心;超速离心;线粒体

期刊名称: 基因组学与应用生物学

ISSN: 1674-568X

年卷期: 2015 年 34 卷 08 期

页码: 1734-1738

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为满足高通量二代测序要求,本研究采用大豆黄花苗为试材,结合差速离心、蔗糖密度梯度离心及超速离心方法提取高纯度大豆线粒体基因组DNA(mt DNA)。结果表明,差速离心能够有效去除核基因组掺杂;超速离心与蔗糖密度梯度离心结合能够有效去除叶绿体污染。提取的mt DNA经琼脂糖凝胶电泳、紫外光度计检测及叶绿体和细胞核特异性引物检测表明,该方法提取的大豆mt DNA无叶绿体DNA及核DNA污染,且纯度高,可满足测序等对线粒体高纯度的要求,为研究大豆线粒体相关性状的机理奠定了坚实基础。

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