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东方山羊豆GoMIPS双元表达载体的构建及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 李春艳 1 ; 刘建宁 1 ; 高洪文 2 ;

作者机构: 1.山西省农业科学院畜牧兽医研究所

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

关键词: 东方山羊豆(Galega.orientalis L.);GoMIPS;pMD19-T;pCAMBIA1302

期刊名称: 家畜生态学报

ISSN: 1673-1182

年卷期: 2013 年 34 卷 01 期

页码: 25-28

摘要: 从东方山羊豆(Galega.orientalis L.)中克隆出的GoMIPS(肌醇-1-磷酸合成酶)基因序列设计合成1对带有NcoI和SpeI酶切位点的引物,用RT-PCR方法从东方山羊豆幼嫩叶片总RNA中扩增出GoMIPS基因的cDNA序列,经纯化后,克隆至pMD19-T载体上,构建pMD-MIPS的中间载体,测序鉴定。然后用NcoI和SpeI限制性酶对含有目的基因的pMD-MIPS和pCAMBIA1302空载体进行双酶切,通过酶切鉴定和测序分析表明,已成功构建了CaMV35S启动子驱动GFP报告基因的双元植物表达载体pCAMBIA1302-MIPS。

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