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甘薯褪绿斑病毒外壳蛋白的分子变异及其特异抗血清制备

文献类型: 中文期刊

作者: 乔奇 1 ; 秦艳红 2 ; 张德胜 3 ; 田雨婷 1 ; 王爽 2 ; 王永江 3 ; 张振臣 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院植物保护研究所

2.河南省农作物病虫害防治重点实验室

3.农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室

关键词: 甘薯褪绿斑病毒;外壳蛋白;分子变异;原核表达;抗血清制备

期刊名称: 植物病理学报

ISSN: 0412-0914

年卷期: 2014 年 44 卷 06 期

页码: 634-640

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 甘薯褪绿斑病毒(Sweet potato chlorotic fleck virus,SPCFV)是侵染甘薯的主要病毒之一。本研究利用RT-PCR方法克隆了SPCFV中国4个分离物的外壳蛋白(CP)基因。序列分析表明,cp基因全长900 bp,编码299个氨基酸残基。4个分离物cp基因的核苷酸序列一致性为78.3%~89.9%,推导的氨基酸序列一致性为91.3%~95.7%,存在较大的分子变异。不同分离物CP氨基酸序列N末端的第3-32位氨基酸为多变区。将四川分离物的cp基因克隆到原核表达载体p ET-28a(+)上,SDS-PAGE分析表明,经IPTG诱导,cp基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了高效表达。以表达的蛋白为抗原免疫家兔,制备了SPCFV CP的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清效价达1∶128 000,可用于田间甘薯样品的检测。

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