文献类型： 中文期刊

作者： 黄允真 ¹ ; 张俊勤 ¹ ; 李林林 ¹ ; 董嘉文 ¹ ; 向勇 ¹ ; 廖明 ¹ ; 孙敏华 ¹ ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部禽流感等家禽重大疾病防控重点实验室/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室

关键词： 坦布苏病毒;非结构蛋白;RIG-I信号通路;I型干扰素;TBK1磷酸化

期刊名称： 广东农业科学

ISSN： 1004-874X

年卷期： 2024 年 51 卷 007 期

页码： 151-160

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】坦布苏病毒(Tembusu virus，TMUV)病是重要的水禽传染病，研究发现TMUV感染鸭早期，2群TMUV在肝、肾、脑等组织中的病毒拷贝数显著高于3群TMUV。研究2群TMUV非结构蛋白(Non-structural protein，NS protein)和3群TMUV NS蛋白对鸭天然免疫反应是否存在差异。【方法】以2群TMUV-JM株和3群TMUV-GX株为研究对象，构建两种毒株NS蛋白真核表达质粒，通过双荧光素酶报告系统研究NS蛋白对视黄酸诱导基因蛋白I(Retinoic acid-inducible gene protein I，RIG-I)诱导的β干扰素(β interferon，IFN-β，为I型)启动子活性的影响。构建重组嵌合NS1蛋白真核表达质粒，通过激光共聚焦、免疫共沉淀、Western Blotting技术研究NS1与RIG-I信号通路中关键分子的互作区域。利用反向遗传操作系统构建NS1重组嵌合病毒，研究NS1在TMUV感染DEF细胞后对IFN-β产生的抑制作用。【结果】TMUV-JM株NS1能抑制RIG-I诱导的IFN-β启动子活性，而TMUV-GX株NS1对其无抑制作用。进一步研究发现，TANK结合激酶1(TANK-binding kinase 1，TBK1)为TMUV-JM NS1蛋白抑制RIG-I介导的I型IFN表达的作用节点分子，且NS1蛋白255～352 aa为发挥抑制作用的功能区域。TMUV-JM NS1与TBK1不存在直接相互作用，是间接降低TBK1磷酸化水平从而降低I型IFN的表达量。【结论】2群TMUV NS1具有抑制RIG-I信号通路的活性，并鉴定出其抑制功能的关键活性区域及作用的通路节点分子，明确2群TMUV NS1通过间接抑制TBK1磷酸化而影响鸭I型IFN产生。