文献类型: 中文期刊
作者: 秦晓冰 1 ; 金宁一 2 ; 牛晋国 3 ;
作者机构: 1.青岛农业大学动物科技学院
2.解放军军事医学科学院军事兽医研究所
3.山西省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: 重组转移质粒;构建;重组鸡痘毒;筛选
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2009 年 29 卷 08 期
页码: 959-963
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 以pUTA2LacZ为真核表达载体,以中国流行株O型口蹄疫病毒(FMDV)NY00株结构蛋白前体P1基因、猪2型圆环病毒内蒙株的衣壳蛋白和复制蛋白基因为目的基因,构建了2个重组质粒作为中间转移质粒,标记为pUTALP1-ORF2和pUTALP1-ORF2ORF1。将这2个重组转移质粒分别酶切鉴定后,与鸡痘病毒野毒(FPV)282E4株共转染鸡胚成纤维细胞。结果显示,重组核酸质粒构建正确,并能进行表达。经5-溴-2-脱氧尿苷(BrdU)加压筛选,挑取单个蚀斑,3次纯化,获得2株重组毒vpUTALP1-ORF2ORF1和vpUTALP1-ORF2。结果表明,这2株重组鸡痘毒在电镜下可形成完整的病毒粒子。
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