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巢式PCR检测猪鼻支原体方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 白方方 1 ; 武昱孜 1 ; 靳蒙蒙 1 ; 刘茂军 1 ; 冯志新 1 ; 熊祺琰 1 ; 邵国青 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院

关键词: 猪鼻支原体;巢式PCR;检测

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2013 年 33 卷 07 期

页码: 1007-1010

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 应用巢式聚合酶链式反应(Nested PCR)建立了一种检测猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)的方法,试验中以酚-氯仿法制备模板DNA,根据猪鼻支原体P37序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。在特异性检测试验中,设计的引物不能扩增出猪絮状支原体、猪滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡毒支原体、胸膜肺炎放线杆菌、猪瘟病毒、猪流感病毒、猪圆环病毒及猪繁殖与呼吸综合征病毒等病原体;敏感性试验表明,第1次PCR和第2次PCR的敏感度分别为3.01mg/L和3.01×10-4 mg/L。对41份临床样品肺组织的检测中,普通PCR和巢式PCR的检出率分别为29.3%(12/41)和82.9%(34/41)。结果表明,巢式PCR方法明显优于常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性,为猪鼻支原体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。

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