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利用正交设计优化桃SRAP-PCR反应体系

文献类型： 中文期刊

作者： 张妤艳 1 ; 马瑞娟 1 ; 俞明亮 1 ; 宋宏峰 1 ; 许建兰 1 ; 沈志军 1 ; 蔡志翔 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院园艺研究所

关键词： 桃;SRAP;正交设计;分子标记

期刊名称： 江西农业学报

ISSN： 1001-8581

年卷期： 2010 年 22 卷 08 期

页码： 26-28+31

摘要： 以桃基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、Taq酶、dNTP、引物、模板5种因素4个水平对桃SRAP反应体系进行优化,建立了适合于桃的SRAP-PCR优化反应体系,该25μL反应体系:模板DNA50 ng,MgCl22.5 mmol/L,dNTP200μmol/L,上下引物各0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,以灭菌双蒸水补齐至25μL。PCR反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min。

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