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甘薯褪绿矮化病毒RNase3蛋白的原核表达及抗血清制备

文献类型: 中文期刊

作者: 秦艳红 1 ; 乔奇 1 ; 王爽 1 ; 张德胜 1 ; 王永江 1 ; 田雨婷 1 ; 张振臣 1 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院植物保护研究所河南省农作物病虫害防治重点实验室农业部华北南部作物有害生物综合治理重点实验室

关键词: 甘薯褪绿矮化病毒;RNase3基因;原核表达;抗血清

期刊名称: 植物保护

ISSN: 0529-1542

年卷期: 2018 年 03 期

页码: 138-141

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以本实验室保存的重组质粒为模板,利用PCR方法扩增获得了甘薯褪绿矮化病毒SPCSV的RNase3基因,RNase3基因由690个核苷酸组成,编码229个氨基酸。将RNase3基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,对诱导产物进行SDS-PAGE分析。结果表明,RNase3在大肠杆菌中能高效表达,融合蛋白分子量约为26.5kD。以表达的融合蛋白为抗原,免疫家兔,制备了SPCSV-RNase3的特异性抗血清。ACP-ELISA检测结果表明,制备的抗血清对RNase3融合蛋白的效价达10万倍。

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