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小麦HMW-GS毛细管电泳高效分离体系研究

文献类型: 中文期刊

作者: 王卫东 1 ; 高翔 1 ; 何庆梦 1 ; 姚晓露 1 ; 刘阳 1 ; 杨明明 1 ; 李建芳 1 ; 杨娜 1 ;

作者机构: 1.西北农林科技大学农学院;陕西省小麦工程技术研究中心;山西省农业科学院棉花研究所

关键词: 小麦;高分子量谷蛋白亚基;毛细管电泳;高效分离;亚氨基二乙酸

期刊名称: 麦类作物学报

ISSN: 1009-1041

年卷期: 2018 年 05 期

页码: 542-550

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 小麦高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)与小麦品质密切相关。为构建高效HMW-GS分离体系,以中国春为标准样,通过HPCE(毛细管电泳)方式,在亚氨基二乙酸(Iminodiacetic acid,IDA)缓冲液基础上,系统分析了不同组分浓度、pH以及毛细管电泳参数对HMW-GS分离效果的影响。结果表明,以15%乙腈(Acetonitrile,ACN)+75 mmol·L~(-1) IDA+0.05%羟丙基甲基纤维素(Hydroxypropyl methylcellulose,HPMC)(pH=2.5)为缓冲液,采用内径25μm、检测长度27 cm毛细管,PDA检测波长200 nm,分离电压20 k V,运行温度30℃,样品10.0 k V进样5 s时,亚基分离效果最好,连续多次、多天重复电泳,均可获得稳定图谱。相比传统的Phos-gly体系,图谱分辨率更好,分离重现性更高(亚基出峰时间RSD值小于0.2%)。

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