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鸡补体分子C3d的基因克隆及结构分析

文献类型: 会议论文

第一作者: 章振华

作者: 章振华 1 ; 李永清 2 ; 谌南辉 1 ; 陈小玲 2 ;

作者机构: 1.江西农业大学动物科学院,江西,南昌,30045

2.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,10089

关键词: 鸡补体分子C3d;鸡C3d结合抗原;基因克隆;核苷酸序列;特异性免疫反应

会议名称: 第二届全国现代免疫诊断技术学术研讨会

主办单位: 中华医学会;中华预防医学会

页码: 752-759

摘要: 根据已发表的人、小鼠、地鼠、奶牛、野兔、猪、猩猩、绵羊动物的C3d基因同鸡的C3α链进行序列比较分析,发现在鸡的C3α链上有一段约897bp序列同上述动物有较高的同源性,在上下端保守区域设计一对引物788bp,应用RT-PCR扩增鸡C3d部分基因,并克隆到pMD18-T载体,测序正确后再在上下端分别设计一对引物,理论长度为378bp和336bp,最后用三种PCR产物延伸扩出C3d全长.结果成功获得鸡C3d基因重组质粒pMD18-C3d,序列分析表明所获的鸡C3dcDNA全长为993bp,编码331个氨基酸.分析鸡与上述动物C3d核苷酸及其编码的氨基酸同源性分别在66.6﹪,66.2﹪,67.7﹪,66.2﹪,67.1﹪,67.0﹪,59.6﹪,67.1﹪和61.5﹪,61.9﹪,61.2﹪,61.9﹪,56.5﹪,61.9﹪,54.5﹪,61.5﹪,而哺乳动物核苷酸和氨基酸同源性则在74.2﹪-100﹪和72.2﹪-100﹪之间,通过进化树反映出C3d基因具有种的多样性,亲缘关系越近,进化关系也越近.研究的结果表明,鸡C3d与其它动物的C3d在抗原结合位点上没有氨基酸的变化,而与CR2结合的28肽区氨基酸差异明显,说明鸡C3d结合抗原没有专一性,而结合免疫细胞则有种的特异性,由此可以推测鸡C3d只能增强鸡的特异性免疫反应。

分类号: S854.43`S858.31

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