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栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒cDNA文库的构建及部分序列分析

文献类型: 会议论文

第一作者: 王崇明

作者: 王崇明 1 ; 艾海新 1 ; 中国海洋大学 2 ; 刘英杰 3 ; 王秀华 1 ; 李赟 4 ; 宋微波 4 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院,黄海水产研究所,山东,青岛,266071

2.海水养殖教育部重点实验室,山东,青岛,266003

3.中国水产科学研究院,北京,100039

4.中国海洋大学,海水养殖教育部重点实验室,山东,青岛,266003

关键词: 栉孔扇贝;急性病毒性坏死病毒;cDNA文库;基因克隆;序列分析

会议名称: 国家“863”计划资源环境技术领域第三届海洋生物高技术论坛

主办单位: 中国21世纪议程管理中心

页码: 622-625

摘要: 采用差速和蔗糖密度梯度离心法,分离纯化栉孔扇贝(Chlamysfarreri)急性病毒性坏死症病毒(AcuteVirusNecrobioticVirus,AVNV).用Trizol试剂抽提病毒RNA,采用随机引物和Oligo(dT)双引物法,SuperScriptⅡ反转录酶合成cDNA,并克隆于pUC118质粒上,利用蓝白斑筛选阳性克隆子,PCR法快速鉴定重组质粒.经筛选得到2个阳性克隆23#、52#,插入片段大小约为1200bp和800bp.测序结果与GenBank数据库的比对分析显示,尚未有类似的序列报道,提示该病毒可能为一种新发现的病毒.

分类号: S944.43

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