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表达禽流感HA基因的重组马立克氏病病毒的构建

文献类型： 会议论文

第一作者： 李永清

作者： 李永清 1 ; 杨敬 2 ; 冯国民 1 ; 周雪媚 1 ; 陈小玲 1 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100089

2.军事医学科学院动物中心,100071

关键词： 禽流感病毒;HA基因;马立克氏病病毒;转移载体;基因重组

会议名称： 中国畜牧兽医学会禽病分会第十三次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 321-323

摘要： 本文通过Apa Ⅰ和Not Ⅰ位点将HA基因亚克隆到表达LacZ基因的重组马立克氏病病毒的转移载体中,该转移载体的US片段内含有hCMV启动子和增强子控制的含LacZ和HA基因表达盒克隆,从而成功地构建了表达HA基因的马立克氏病病毒的转移载体.然后,通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,用96孔板稀释法纯化表达LacZ基因和HA基因的重组MDVCV1988病毒株,获得蓝色的重组病毒.该重组病毒通过PCR方法鉴定证实其基因组中含有完整的HA基因.免疫酶反应和Western-blot证实重组病毒能表达禽流感病毒HA蛋白.经6次纯化后,重组病毒的血凝效价达到1.64.

分类号： S852.65`Q78

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