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多重RT-PCR检测猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻病病毒

文献类型： 会议论文

第一作者： 刘惠莉

作者： 刘惠莉 1 ; 陈芳 1 ; 周宗清 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106

关键词： TGEV;PEDV;多重RT-PCR检测;猪传染性胃肠炎;猪流行性腹泻病;病原体

会议名称： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会%中国免疫学会

页码： 186-189

摘要： 为了检测、区分猪传染性胃肠炎(TGE)和猪流行性腹泻(PED),本文建立了同时检测这两种病原体的多重PCR方法:参考GenBank登录的TGEV和PEDV纤突蛋白S基因序列,经DNAsist2.0比较分析,分别筛选出TGEV、PEDVS基因相对保守区.以TGEVTH-98株(GenBank登陆号为AF494337)和PEDVCV777株(GenBank登陆号为NC003436)为参考模板,利用软件Primer3设计合成了两对寡核苷酸引物,以ST细胞培养的TGEV和PEDV毒株核酸为模板,利用所设计的两对引物进行多重RT-PCR扩增,结果同时得到与实验设计相符的499bp(TGEV)和199bp(PEDV)的扩增条带,而对其它三种猪病原的扩增结果均为阴性.敏感性实验结果表明,本实验建立的多重RT-PCR方法可检测出10pgTGEVRNA和100pgPEDVRNA。

分类号： S855.3`S854.43

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[1]多重RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒和猪流行性腹泻病毒. 陈芳,刘惠莉,孙红立,曹祥荣,李震,赵立平. 2005

[2]猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒RT-PCR鉴别诊断技术研究. 邹勇,钱永清,唐永兰,苏万国,何锡忠. 2003

[3]猪四种病毒性腹泻病原多重PCR检测方法的建立及应用. 熊年年,陶洁,张清真,张春玲,李本强,常宏赏,刘惠莉. 2016

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[5]甲壳素对猪传染性胃肠炎免疫调节作用的研究. 邹勇,唐永兰,苏万国,钱永清,何锡忠. 2004

[6]Effective inhibition of porcine transmissible gastroenteritis virus replication in ST cells by shRNAs targeting RNA-dependent RNA polymerase gene. Zhou, Jun-fang,Hua, Xiu-guo,Cui, Li,Zhu, Jian-guo,Miao, De-nian,Zou, Yong,He, Xi-zhong,Su, Wan-guo. 2007

[7]Cell Attachment Domains of the Porcine Epidemic Diarrhea Virus Spike Protein Are Key Targets of Neutralizing Antibodies. Li, Chunhua,Li, Chunhua,Li, Wentao,de Esesarte, Eduardo Lucio,Guo, Hongbo,Rottier, Peter J. M.,Bosch, Berend-Jan,van den Elzen, Paul,Aarts, Eduard,van den Born, Erwin.

[8]应用微载体技术生产TGEV试验研究. 邹勇,周燕,王建超,华平,何锡忠,苏万国,唐永兰,钱永清. 2005

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